紫阳绞股蓝主要成分分析及其功效说明

(西安市产品质量监督检验所，陕西 西安 710065)
摘 要：文章介绍了通过高效液相色谱法与分光光度计法等多个检测方法，测定紫阳产绞股蓝的主要功效成分的过程，并将其与其他植物比较得出其具有独特的功效作用。
关键词：绞股蓝；皂甙；硒
中图分类号：R282.7  文献标识码：A  文章编号：1007—6921(2008)12—0037—02

绞股蓝又名七叶胆、五叶参，自然生长于陕西南部，湖北西部山区，绞股蓝在古时民间已被广泛使用，把它作为“神奇”的“不老长寿药草”。明代称之为“神仙草”。绞股蓝其名始于1525年明嘉定四年朱棣所著《救荒本草》一书，中国药典亦称绞股蓝。

现在查明，绞股蓝主要成分为绞股蓝皂甙(GP)，皂甙、黄酮、多糖、氨基酸、微量元素。皂甙成分：目前已分得单体皂甙83种，均属达玛脂烷醇类结构，其中绞股蓝皂甙3、4、8 、X2分别与人参皂甙Rb1、Rd3、Rb、F2是同一物质，绞股蓝皂甙 1酶解，得人参皂甙K3，绞股蓝皂甙V-AH与人参皂甙Rg3相同，其余均可视为 原人参二醇及原人参三醇的异构体。氨基酸：共有18种氨基酸，其中有6种人体必需的氨基酸。微量元素：绞股蓝含有的各种常量元素和微量元素，人体所需的微量元素锰(Mm)、锌(Zn )、铁(Fe)等在绞股蓝中含量较高，陕西产地的绞股蓝中含有硒(Se)，黄酮类化合物，多糖。经初步分析绞股蓝、叶中均含有果糖、葡萄糖、半乳糖和低聚糖。

为进一步研究绞股蓝功效成分具体含量，笔者对市售紫阳县绞股蓝茶叶做了全面的成分分析，为使数据有参考性，特同时做一紫阳陕青茶叶作一对比，现将最主要功效成分分析方法陈述如下：
1 绞股蓝皂甙含量测定
1.1 试剂

甲醇(色谱纯)；水(重蒸水)；绞股蓝皂甙标准品(纯度≥98%)。

绞股蓝皂甙标准溶液的制备：精确称取绞股蓝皂甙标准品10mg，加流动相甲醇+水（55+45）溶解并移入100mL容量瓶中，定容至刻度。
1.2 仪器设备

高效液相色谱仪、附紫外检测器；

色谱柱：C₁₈（以十八烷基键合硅胶填料为填充剂）或具同等性能的色谱柱，150mm×6mm，5μm；超声波清洗器；
C₁₈净化富集柱：C₁₈预柱装量0.5g，分配型；
离心机：3 000r/min。
1.3 色谱分离条件
流动相：甲醇+水=55+45
流速：1mL/min
柱温：40℃
检测波长：293nm
灵敏度：0.016AUFS
进样量：10μL
1.4 分析步骤

试样制备：将固体试样粉碎成粉末状，混匀。准确称取上述经处理后的试样1.00g于50mL容量瓶中，加检测用流动相30mL溶解，经超声振提5min加流动相定容50mL，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤。

测定步骤：分别精密吸取标准溶液和试样溶液10μL注入高效液相色谱仪，依上述色谱条件，以保留时间定性，用外标法计算试样中绞股蓝皂甙的含量。

最终测得绞股蓝1#样品与2#样品皂甙含量为2.68,2.74，而茶叶的绞股蓝皂甙的含量为未检出。
2 微量元素中硒含量的测定
2.1 试剂和材料
　　 硫酸：优级纯
　　混合酸：硝酸——硫酸——高氯酸(14+2+2)
　　乙二胺四乙酸二钠(EDTA一2Na)溶液：0.1％
　　盐酸羟胺溶液：10％
　　氨水溶液(1+1)
　　盐酸溶液(1+1)
　　盐酸溶液：0.1mol／L
　　环己烷：经测定无荧光杂质，有必要时重蒸馏后使用。
甲酚红指示剂：称取0.1g甲酚红，加1滴50％氢氧化钠和10mL水溶解，并稀释到50mL。
2，3一二氨基萘(DAN)溶液：在暗室中配制。称取0.1g DAN，加0.1 mol／L盐酸溶液100mL，振摇使其溶解。将溶液转入250mL分液漏斗中，加20mL环己烷，剧烈振摇5min，静置分层后，弃去环已烷相。再加入20mL环己烷，重复萃取三次，收集水相于100mL棕色容量瓶，用水定容并覆盖一层环己烷，储存于冰箱中，每次临用前再用20mL环己烷萃取一次。

硒标准溶液：准确称取0.1000 g硒(纯度≥99.9％)，加5 mL硝酸，温热使其溶解；加水稀释到100 mL，此溶液每毫升相当于100 pg硒。硒标准工作液：吸取10.0 mL硒标准溶液置于100 mL容量瓶，以0.1 mol／L盐酸溶液稀释至刻度，混匀，依次稀释到每毫升相当于0.1 pg硒。
2.2 仪器和设备
　　 荧光分光光度计
　　凯氏烧瓶：250 mL
　　分液漏斗：125 mL，250 mL
　　电热恒温水浴锅
　　控温电炉
　　具塞三角烧瓶：100 mL
　　 具塞刻度试管：5 mL
　　称取1.00 g样品置于250 mL凯氏烧瓶中，用少量水润湿样品，加入18 mL混合酸，在控温电炉上加热消化。应逐渐升高温度，消化至冒高氯酸白烟，保持1 min，此时溶液呈无色或浅黄色，即为消化终点(在消化过程中如出现炭化现象，需重新取样消化)。取下冷却，加20 mL水，继续加热至冒高氯酸白烟；取下稍冷，加l0 mL水，待冷却到室温，用20 mL～30 mL水将样液转入100 mL具塞三角烧瓶中，加0.19／6EDTA一2Na溶液2 mL。
　　按样品操作步骤，同时做试剂空白及相应含量的硒标准。
　　在上述消化液中加入2滴甲酚红指示剂，以氨水溶液(1+1)和盐酸溶液(1+1)调节至溶液呈微橙红色。然后，加10％盐酸羟胺溶液1 mL，放置2 min，以下步骤需在暗室内进行。各加入DAN溶液2 mL，摇匀，置沸水浴中加热5 min，取出，冷却到室温。全部溶液转入125 mL分液漏斗中，加入5 mL环己烷，振摇萃取2 min，静置分层，放出下层水相，弃去。将环己烷层从分液漏斗上部倒入5 mL具塞试管中，并用环己烷定容至刻度。
2.3 测定

荧光分光光度计测定条件如下：激发波长380 nm，发射波长523 nm，狭缝10 nm，1 cm测量池。分别测定样液、试剂空白液和硒标准液中4，5一苯并苤硒脑络合物的荧光强度，与标准对照定量。
检测得结果1#样品与2#样品的硒含量分别为8.1μg/kg, 8.5μg/kg, 而茶叶的硒含量为10.6μg/kg。
3 其他主要成分的检测方法均为标准方法，其均侄结果分别如下
氨基酸含量，13.1%
总黄酮（以芦丁计）：　　　　　1.2%
多糖：　　　　　　　　　　　0.80%
总磷：　　　　　　　　　　　0.31%
维生素B1：　　　　　　　　　　135mg/kg
维生素B2：　　　　　　　　　　10.0mg/kg
维生素C：                     1.30mg/kg
钙（Ca)：                     1280mg/kg
铁（Fe)：　　                  121mg/kg
锌（Zn)：                      0.0021%
4 结论

茶叶在微量元素和维生素范围的含量和绞股蓝含量差别不大，但在功效成分总黄酮与多糖远少于绞股蓝，由此可见，绞股蓝有丰富的功效物质使得其有多种保健药用价值，又由于地理环境的影响，紫阳的茶叶与绞股蓝均富硒，使其有独特的功效。绞股蓝各主要功效成分的作用如下：
4.1 绞股蓝皂甙性能

绞股蓝所含皂甙总数有人参的4倍之多，它具有人参的作用，还有人参所没有的作用——清热解毒，又无人参过量服用的副作用。
4.2 黄酮类化合物

在防治动脉粥样硬化方面有较好的疗效。
4.3 绞股蓝多糖

多糖具有复杂面又多方面的生物活性，许多植物多糖对提高机体免疫力、抗癌、抗放射等都有一定作用，在医药领域中越来越受到人们的重视。绞股蓝茎叶中含有多糖。
4.4 绞股蓝磷脂

磷脂类成分对维持生物膜结构的完整及功能，调整人体的生理机能有重要意义。它具有增强免疫功能，补血和促进粥样硬化斑消散，增强胰岛素、骨细胞和神经细胞功能等作用，溶血磷脂酰胆碱尚有抗癌作用。
4.5 绞股蓝氨基酸

业已公认蛋白质、氨基酸为构成机体的重要物质基础。绞股蓝中含有18种氨基酸，包括人体必需的氨基酸和药效氨基酸。
4.6 无机元素

绞股蓝含有23种以上元素。其中13种为人体必需微量元素：铁、锌锰、铬、铜、钼、钴、硒、镍、钒、锶、硅、硼等。同时还含有5种人体必需的常量元素：钙、磷、钾、钠、镁等。绞股蓝中具明显抗癌活性的元素有7种：硼、镁、锰、钼、硒、锌、铜等，这可能是绞股蓝抗多种癌症的重要原因之一，尤其是元素硒在抗癌、保护心血管、防衰老方面有较好的作用。
［参考文献］
［1］ 赵昌琼.绞股蓝的功效说明［J］.西南师范大学学报，2002，28（1）：122～125.
［2］ 张明生.地理环境与植物微量组分关系的研究［J］.中国农业科学，2005，25（1）：13～16.
［3］ 中华人民共和国国家出入境检验检疫局发布进出口茶叶中硒的检验方法荧光光度法［S］.SN／T 0926-2000.

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