用正交设计法对祛痰经方的优选

摘 要：目的：探讨经方中哪些药对小鼠起主要的祛痰作用。方法：采用正交设计组方，以小鼠气管酚红排泌量作为指标，寻找处方中的优化成分。结果：经方的祛痰作用明显，其中以太子参、干黄芪、杏仁对祛痰具有显著的影响（P＜0.05）。结论：经实验筛选得出太子参、干黄芪、杏仁有显著的祛痰作用。

关键词：正交设计；祛痰；处方优选；中草药

中图分类号：R289文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）02-048-02

祛痰经验方作为湖北中医学院附属门诊制剂，其主药选用了干黄芪、法夏、桔梗，配以鱼腥草、陈皮、知母、太子参、炒二芽、神曲、杏仁、蜈蚣、甘草等，经过10多年临床应用，证实具有化痰平喘、止咳消炎的作用，治疗慢性支气管炎、支气管哮喘有较好疗效。但本方组成药物过多，故本实验拟通过正交组方，以小鼠气管酚红排泌量为依据，找出此经方中起主要作用的药物，以对本方进行合理的化裁。

1 试验设计

1.1 因素水平的确定

选择14味药物为研究因素：干黄芪、法夏、桔梗、鱼腥草、陈皮、炒二芽、神曲、杏仁、蜈蚣、知母、太子参、竹茹、五味子、甘草。每个因素选择两个水平，即给药和不给药，以水平1表示不给药，以水平2表示给药，列因素水平表（见表1）。

1.2 正交设计的选择

本研究拟从14味药中优选最佳配伍，每个因素选择两个水平，不考虑各因素间的交互作用，选择L16(215)正交表并列出实施方案，见表2。

2 实验材料

2.1 实验药品制备

将按不同处方配好的药物浸泡1h，加10倍量水，煎煮3次，过滤，浓缩至0.1g/ml的药液。以生理盐水为阴性对照，以京都川贝枇杷冲剂为阳性对照，研究祛痰经方中祛痰作用最强的因素。

2.2 试剂和仪器

试剂：干黄芪、法夏、桔梗、鱼腥草、陈皮、炒二芽、神曲、杏仁、蜈蚣、知母、太子参、竹茹、五味子、甘草由湖北中医学院医学院校医院提供，经生药教研室鉴定。酚红，由上海新中化学厂生产，批号：l-60-01-20。京都川贝枇杷冲剂，由京都药业有限公司生产。其它试剂均为国产分析纯。仪器：721分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；小型通用离心机(TGL-l6GB型，上海安亭科学仪器厂)。

2.3 实验动物

采用健康SPF级昆明种小白鼠，体重(20±2)g，雌雄各半，购自湖北省医学实验动物中心，共160只，合格证号：scxk(鄂)2003—2005。

3 实验方法［1-3］

昆明种小鼠160只，随机分为16组。按表2中的给药因素设计ig，按0.2ml/10g给药5d。第4日给药后禁食不禁水，末次给药后0.5h分别腹腔注射0.5％酚红溶液0.25ml/10g，0.5h后颈椎脱臼法处死小鼠，分离气管，以5％碳酸氢钠溶液0.5ml冲洗小鼠气管及支气管，来回冲洗3次，冲洗液置于试管中，再重复2次，合并冲洗液［4］，高速离心(9500rpm)5min，小心取上清液于紫外可见分光光度计上，以波长520nm测定其吸光度值。

4 实验结果

4.1 吸光度值结果见表2

4.2 结果分析

4.2.1 经方差分析

主要影响因素的大小顺序为：太子参＞干黄芪＞杏仁＞知母＞鱼腥草＞陈皮，结合水平看处方，为太子参54.6ml、干黄芪81.9ml、杏仁27.3ml、知母54.6ml、鱼腥草163.8ml、陈皮54.6ml。

4.2.2 方差分析

方差分析结果见表3，可以看出，最重要的影响因素为太子参，其次为干黄芪、杏仁，其余各因素影响不大。因此，最佳处方应该是太子参、干黄芪、杏仁、知母、鱼腥草、陈皮。

5 讨论

“痰”有狭义、广义之分。狭义之痰，指咳吐痰涎；广义之痰，泛指停在脏腑经络的病理产物，两者皆由津液凝聚所成。痰病的成因很多，治法各不相同，如脾失健运、湿聚成痰者，治宜燥湿健脾化痰；火热内盛、灼津为痰者，治宜清热化痰；肺燥阴亏、虚火烁液为痰者，治宜润肺化痰；脾肾阳虚、寒饮内停，或肺寒留饮者，治宜温化寒痰；肝风内动、夹痰上扰者，治宜熄风化痰。祛痰法一般分为祛痰止咳、化痰除浊、消痰散结、涤痰调神4类。祛痰剂是治疗各种痰病的方剂，以祛痰药为主要成分，具有消除痰饮、制止咳嗽的作用。祛痰剂适用于各种痰病，如湿痰证、热痰证、燥痰证、寒痰证、风痰证等。痰之与饮，异名而同类，稠浊者为痰，清稀者为饮，皆为水液代谢的病理产物，乃湿聚而成。痰之为病，无处不到，胸、肠、胃、经络、四肢，皆可有之，其发病常见咳嗽喘促、头痛眩晕、胸痹呕吐、中风痰厥。因此汪昂在《医方集解》中说：“在肺则咳，在胃则呕，在头则眩，癫狂惊痫以及痰核瘰疬等在心则悸，在背则冷，在胁则胀，其变不可胜穷也。”

本试验采用的16种组方，对基于临床实践经验得出的祛痰经方中14味中药的祛痰效果进行了实验研究，结果表明，这14味药中以太子参的祛痰作用最为显著（P＜0.05)，其次为干黄芪、杏仁，知母、鱼腥草也有比较好的效果，其余各因素影响不大。由此得出，该经方中以太子参、干黄芪、杏仁、知母、鱼腥草、陈皮最为有效。

本研究采用严格、合理的正交设计方案筛选了该经方，为进一步提高临床疗效以及今后在此基础上筛选祛痰的基本配方提供了依据。

参考文献：

［1］ 沈映君.中药药理学［M］.北京：人民卫生出版社，2000.

［2］ 李仪奎，王钦茂.中药药理学试验方法［M］.上海：上海科技出版社，1991.

［3］ Engler H，Szelenyi I. Tracheal Phenol Red Secretion，a New Method for Screening Mucosecretolytic Compounds［J］.J Pharmacol Methods，1984(11):151-157.

［4］ 彭代银.强力枇杷冲剂药效毒性研究和临床观察［J］.中成药，1997，19（11）：41.

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(责任编辑：杜 靖)

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